Daun pepaya (Carica papaya L) mengandung flavonoid yang memiliki aktivitas sebagai antioksidan. Daun pepaya dapat dibuat sediaan berupa serbuk simplisia serta ekstrak segar untuk meminimalkan proses pemanasan yang berpengaruh terhadap kadar total flavonoid dan aktivitas antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk menengetahui kadar total flavonoid dan aktivitas antioksidan perasan segar dan seduhan daun pepaya menggunakan metode DPPH. Daun pepaya dibuat 2 sediaan yaitu sari air dan seduhan. Sari air dibuat dari daun segar diekstraksi dengan cara diblender dengan penambahan air perbandingan 1:1 hingga diperoleh sari air daun pepaya kemudian dipekatkan. Seduhan dibuat dengan mengeringkan daun pepaya dengan kering angin kemudian diserbuk. Kedua bentuk sediaan dilakukan uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH. Hasil penelitian menunjukan bahwa perasan segar dan seduhan daun pepaya mengandung senyawa fenol, flavonoid, tannin dan steroid. Senyawa saponin tidak terdeteksi pada perasan daun papaya. Nilai IC50 dari perasan segar adalah 322,64 ppm dengan kategori lemah dan seduhan daun papaya adalah 147,71 ppm dengan kategori sedang.