Abstract: Citrus Vein Phloem Degeneration (CVPD) disease outbreaks in citrus are one of the limiting factors in conventional vegetative cultivation. This affects the availability of plant material for cultivation, which in turn impacts the productivity and sustainability of Siam Pontianak orange cultivation. Micropropagation through indirect somatic embryogenesis in liquid medium is expected to produce a larger number of disease-free seedlings. Cells from embryogenic callus have the potential to develop into new individuals and are widely used for plant propagation and genetic manipulation. This study aims to determine the best treatment combination for embryogenic callus propagation in solid medium and to observe embryo development in cell suspension culture. The study used a completely randomized design (CRD) consisting of two stages: (1) micropropagation of embryogenic callus on Murashige Skoog (MS) solid medium suplemented with of 0.5 ppm 2,4-D + 0.5 ppm kinetin; 0.5 ppm 2,4-D + 1.5 ppm kinetin; 1.0 ppm 2,4-D + 1.0 ppm kinetin; 1.5 ppm 2,4-D + 1.5 ppm kinetin; and 2.0 ppm 2,4-D + 2.0 ppm kinetin; and (2) proliferation and development of somatic embryos in cell suspension culture on liquid MS medium with the following treatments: without Plant Growth Regulators (D0K0); 1.0 ppm kinetin (D0K1); 0.5 ppm 2,4-D + 1.0 ppm kinetin (D0.5K1); 1.0 ppm 2,4-D (D1K0); and 1.0 ppm 2,4-D + 1.0 ppm kinetin (D1K1). The results showed that the medium with 1.0 ppm 2,4-D + 1.0 ppm kinetin produced the highest average fresh weight (0.568 g), which was significantly different from all other treatments. Somatic embryo formation was observed in all suspension culture treatments 14 days after culture (DAC). Observations at 42 DAC showed that embryo development in the 1.0 ppm 2,4-D + 1.0 ppm kinetin treatment had reached the heart stage (60%), while the other treatments showed embryos only at the globular stage. Abstrak: Serangan penyakit Citrus Vein Phloem Degeneration (CVPD) pada tanaman jeruk merupakan salah satu faktor penghambat dalam budidaya vegetatif konvensional. Ketersediaan bahan tanaman, khususnya dalam budidaya jeruk Siam Pontianak, sangat penting bagi produktivitas dan keberlanjutan budidayanya. Perbanyakan melalui indirect somatic embryogenesis dari kalus embriogenik pada media cair dapat menghasilkan bibit yang bebas penyakit dalam jumlah lebih besar. Sel kalus bersifat embriogenik yang diinduksi dari eksplan kotiledon pada media MS dengan penambahan 2,4-D dan kinetin memiliki potensi untuk berkembang menjadi individu baru. Penelitian ini bertujuan memperoleh kombinasi perlakuan terbaik sebagai media perbanyakan kalus embriogenik serta mengamati perkembangan embrio pada kultur suspensi sel. Penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) terdiri atas 2 tahap, yaitu: (1) optimasi perbanyakan kalus embriogenik pada media padat MS dengan penambahan 0,5 ppm 2,4-D + 0,5 ppm kinetin; 0,5 ppm 2,4-D + 1,5 kinetin; 1,0 ppm 2,4-D + 1,0 ppm kinetin; 1,5 ppm 2,4-D + 1,5 ppm kinetin, dan 2,0 ppm 2,4-D + 2,0 ppm kinetin; serta (2) proliferasi dan perkembangan embrio somatik pada kultur suspensi sel pada media MS cair dengan perlakuan: tanpa penambahan Zat Pengatur Tumbuh (D0K0); 1,0 ppm kinetin (D0K1); 1,0 ppm 2,4-D (D1K0); 0,5 ppm 2,4-D + 1,0 ppm kinetin (D0,5K1), dan 1,0 ppm 2,4-D + 1,0 ppm kinetin (D1K1). Hasil penelitian menunjukkan bahwa media dengan kombinasi 1,0 ppm 2,4-D + 1,0 ppm kinetin menghasilkan rerata berat basah kalus terbesar (0,568 g) dan berbeda nyata dengan semua perlakuan. Persentase pembentukan embrio somatik sebesar 100% terlihat pada semua perlakuan kultur suspensi umur 14 hari setelah tanam (hst). Pengamatan pada 42 hst menunjukkan bahwa perkembangan embrio pada perlakuan 1,0 ppm 2,4-D + 1,0 ppm kinetin telah mencapai tahap jantung (60%), sedangkan perlakuan lainnya hanya menunjukkan embrio pada tahap globular.
Copyrights © 2026