Pembelajaran Biologi pada materi Sel memiliki karakteristik konsep yang kompleks dan abstrak sehingga diperlukan media pembelajaran yang menarik, ringkas, dan sesuai dengan karakteristik peserta didik. Namun, penggunaan media berbasis Microlearning yang diuji dari aspek validitas, kepraktisan, dan efektivitas masih relatif terbatas. Penelitian ini bertujuan mengembangkan media video berbasis Microlearning pada materi Sel untuk siswa kelas XI SMA serta mengetahui validitas, kepraktisan, dan efektivitas media yang dikembangkan. Penelitian ini menggunakan metode Research and Development (R&D) dengan model ADDIE yang meliputi tahap analisis, desain, pengembangan, implementasi, dan evaluasi. Subjek penelitian terdiri atas dua ahli materi, satu ahli media, satu ahli desain, serta 31 siswa kelas XI dan seorang guru. Data dikumpulkan melalui lembar validasi, kuesioner, pretest, dan posttest, kemudian dianalisis secara kuantitatif menggunakan persentase, uji normalitas, uji homogenitas, dan paired sample t-test. Hasil penelitian menunjukkan bahwa media video berbasis Microlearning memperoleh kualifikasi sangat baik berdasarkan hasil validasi ahli dan respons pengguna. Kepraktisan media memperoleh persentase respons guru sebesar 94,67%, siswa secara perorangan sebesar 87,11%, dan siswa kelompok kecil sebesar 87,70%. Hasil paired sample t-test menunjukkan nilai signifikansi 0,001 < 0,05, yang berarti terdapat perbedaan kemampuan pemahaman konsep sebelum dan sesudah penggunaan media. Dengan demikian, media video berbasis Microlearning dinyatakan valid, praktis, dan efektif digunakan dalam pembelajaran Biologi pada materi Sel.