Latar belakang: Peningkatan jumlah resistensi antibiotik menimbulkan permasalahan serius dalam pelayanan Kesehatan termasukpada bakteri Staphylococcus aureus (S. aureus). Infeksi S. aureus ditandai dengan kerusakan jaringan yang disertai luka bernanah. Beberapa penyakit infeksi S. aureus termasuk bisul, jerawat, serta infeksi luka, infeksi tersebut dapat berkembang menjadi infeksi serius antara lain mastitis, phlebitis, osteomielitis dan endocarditis. Permasalahan ini salah satunya dengan memanfaatkan khasiat dari tanaman seperti daun katuk (Sauropus androgynus (L.) Merr) dan daun sirih hijau (Piper betle L.) sebagai kandidat antibakteri baru. Tujuan: penelitian ini adalah untuk menentukan daya hambat ekstrak daun katuk dan daun sirih hijau terhadap bakteri S. aureus. Matode: Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental. Ekstrak daun katuk dan daun sirih hijau diperoleh dengan metode ekstraksi maserasi, pengenceran seri konsentrasi 1%, 2%, 4%, 8%, dan 16% dilanjutkan dengan uji aktifitas antibakteri metode difusi cakram terhadap S. aureus, kontrol positif menggunakan antibiotik kloramfenikol dan kontrol negatif menggunakan aquades. Hasil: Penelitian menunjukkan rata-rata zona hambat ekstrak daun katuk dengan konsentrasi 1% dan 16% masing-masing 0,06 mm dan 2,01 mm. Ekstrak daun sirih hijau menghasilkan rata-rata zona hambat sebesar 0,22 mm pada konsentrasi 1% dan 1,01 mm pada konsentrasi 16%. Kesimpulan: Ekstral daun katuk dan ekstral daun sirih hijau menunjukkan aktifitas antibakteri, zona hambat meningkat seiring dengan peningkatan konsentrasi. Namun demikian, konsentrasi rendah (<16%) menunjukkan aktifitas antibakteri yang lemah.