ISOLASI, PEMURNIAN DAN KARAKTERISASI ENZIM SELULASE DARI Bacillus subtilis ITBCCB148

Putri Amalia, Tati Suhartati, Sutopo Hadi, Yandri,

SEMIRATA 2015
Prosiding Bidang Kimia

Enzim selulase dari bakteri lokal Bacillus subtilis ITBCCB148  telah berhasil diisolasi, dan dimurnikan.  Isolasi enzim dilakukan menggunakan sentrifuga dingin untuk memisahkan enzim dari campuran sel.  Pemurnian enzim dilakukan dengan fraksinasi menggunakan ammonium sulfat dan dialisis. Terhadap enzim selulase hasil pemurnian telah dilakukan karakterisasi meliputi: penentuan suhu optimum, pH optimum, konsentrasi substrat dan stabilitas termal.  Aktivitas enzim selulase ditentukan dengan metode Mandels sedangkan penentuan kadar protein dengan metode Lorwy. Hasil penelitian menunjukkan bahwa aktivitas spesifik enzim hasil pemurnian 16,2 U/mg, meningkat 3,6 kali dibandingkan dengan ekstrak kasar enzim. Enzim hasil pemurnian memiliki suhu optimum 55oC, pH optimum 6, harga KM = 3,82 mg mL-1 substrat, dan harga Vmaks =  204,08 µmol mL-1 menit-1. Uji stabilitas termal enzim hasil pemurnian selama 60 menit pada suhu 55oC menunjukkan waktu paruh sebesar 19,5 menit. Kata kunci: Selulase, Bacillus subtilis ITBCCB148