The accuracy of blood glucose results is influenced by various factors, one of the most important of which is the pre-analytical stage. Blood glucose levels can decrease if plasma separation is delayed, because blood cells continue to carry out the glycolysis process. The method used in this study was an experiment with a posttest-only control group design, employing purposive sampling that involved 5 respondents and 4 treatment conditions for each type of tube based on Federer’s formula. The sample consisted of sixth-semester students in the D3 medical laboratory technology programme who met the inclusion and exclusion criteria. Blood glucose levels were measured using the GOD-PAP method with a BIOBASE chemistry analyser. The results of the analysis showed that blood glucose levels in both types of tubes decreased as the plasma separation delay time increased. For NaF plasma, the One-Way ANOVA test yielded a p-value > 0.05, indicating that variations in the plasma separation delay time had no significant effect. In contrast, the Kruskal-Wallis test for EDTA plasma yielded a p-value < 0.05, which indicated a significant difference in each delay time variation. Based on these results, NaF plasma was better able to maintain stable blood glucose levels during the plasma separation delay compared to EDTA plasma. This is caused by the sodium fluoride content in the NaF tube, which acts as an antiglycolytic agent, so it is able to inhibit the glycolysis process and maintain stable glucose levels in the blood. ABSTRAK Keakuratan hasil glukosa darah dipengaruhi oleh berbagai faktor, salah satunya yang paling penting pada tahap pra-analitik. Kadar glukosa darah dapat mengalami penurunan apabila pemisahan plasma ditunda, karena sel-sel darah tetap melakukan proses glikolisis. Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah eksperimen dengan desain Posttest Only Control Group Design menggunakan teknik purposive sampling yang melibatkan 5 responden dan 4 perlakuan setiap jenis tabung berdasarkan rumus Federer. Pemilihan sampel terhadap mahasiswa Program Studi D3 Teknologi Laboratorium Medis semester 6 sesuai kriteria inklusi dan eksklusi. Pemeriksaan kadar glukosa darah dilakukan menggunakan metode GOD-PAP dengan BIOBASE Chemistry Analyzer. Hasil analisis menunjukkan bahwa kadar glukosa darah pada kedua jenis tabung mengalami penurunan seiring dengan bertambahnya waktu penundaan pemisahan plasma. Pada plasma NaF hasil uji One Way ANOVA diperoleh nilai p>0.05, sehingga variasi waktu penundaan pemisahan plasma tidak memberikan pengaruh yang signifikan. Sebaliknya, plasma EDTA uji statistik Kruskal Wallis menunjukkan nilai p<0.05, yang mengindikasikan adanya perbedaan yang signifikan pada setiap variasi waktu penundaan. Berdasarkan hasil tersebut, plasma NaF lebih mampu mempertahankan stabilitas kadar glukosa darah selama penundaan pemisahan plasma dibandingkan plasma EDTA. Hal ini disebabkan oleh kandungan natrium fluorida pada tabung NaF yang berperan sebagai agen antiglikolitik, sehingga mampu menghambat proses glikolisis dan menjaga kestabilan kadar glukosa dalam darah.