Profesionalisme guru merupakan faktor penting dalam meningkatkan mutu pendidikan karena berpengaruh langsung terhadap kualitas proses pembelajaran. Profesionalisme tersebut tercermin melalui penguasaan empat kompetensi guru, yaitu kompetensi pedagogik, profesional, sosial, dan kepribadian. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis profesionalisme guru Biologi berdasarkan penerapan empat kompetensi guru dalam proses pembelajaran di SMA Negeri 2 Gunungsitoli. Penelitian menggunakan pendekatan kualitatif dengan metode deskriptif. Pengumpulan data dilakukan melalui wawancara, observasi, dan dokumentasi terhadap kepala sekolah sebagai informan utama. Data dianalisis melalui tahap reduksi data, penyajian data, dan penarikan kesimpulan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa guru Biologi telah menerapkan keempat kompetensi guru dengan cukup baik. Kompetensi pedagogik terlihat dari kemampuan guru menyusun modul ajar dan menyesuaikan pembelajaran dengan karakteristik peserta didik. Kompetensi profesional ditunjukkan melalui penguasaan materi serta kemampuan mengaitkan materi Biologi dengan kehidupan sehari-hari. Kompetensi sosial tercermin dari komunikasi yang baik antara guru dengan peserta didik, sesama guru, dan warga sekolah. Kompetensi kepribadian ditunjukkan melalui sikap disiplin, tanggung jawab, serta keteladanan. Kendala yang dihadapi meliputi keterbatasan laboratorium Biologi, terbatasnya sarana praktikum, padatnya jadwal pembelajaran, serta perbedaan motivasi belajar peserta didik. Oleh karena itu, diperlukan peningkatan kompetensi guru secara berkelanjutan serta dukungan sarana pembelajaran agar profesionalisme guru semakin optimal.