<![CDATA[Abstract. Free radicals trigger oxidative stress that contributes to various diseases, so antioxidants are required to counteract them. Previous research reported that the tetrapeptide Phenylalanine-Isoleucine-Glycine-Proline (FIGP) isolated from the skin of bluefin leatherjacket (Navodon septentrionalis) fish possesses antioxidant activity, but the limited yield obtained through isolation restricts its further application. This study aimed to synthesize FIGP using Solid Phase Peptide Synthesis (SPPS), to characterize the synthesized product, and to evaluate its antioxidant activity using the DPPH method. Synthesis was carried out on 2-chlorotrityl chloride resin through reactor conditioning, resin swelling, sequential coupling of Fmoc-protected amino acids (proline, glycine, isoleucine, phenylalanine) using HATU/HOAt/DIPEA, Fmoc deprotection, chloranil testing, and cleavage from the resin using TFA:TIS:Mili-Q (38:1:1). The crude peptide was characterized by reverse-phase HPLC and mass spectrometry, and antioxidant activity was expressed as the IC50 value. Synthesis was successfully performed with a resin loading value of 0.5 mmol. HPLC characterization indicated that sample purity was still low, as several minor peaks were observed, while mass spectrometry confirmed the formation of FIGP with a peak at m/z 431 [M−H]⁻. The DPPH assay yielded an average IC50 of 1522.525 ppm, indicating very weak or negligible antioxidant activity. Further purification using column chromatography with a C18 stationary phase and additional NMR characterization are recommended to confirm the purity and structure of the tetrapeptide. Abstrak. Radikal bebas dapat memicu stres oksidatif yang berperan dalam berbagai penyakit sehingga diperlukan antioksidan untuk menetralisirnya. Penelitian sebelumnya melaporkan bahwa tetrapeptida fenilalanin-isoleusin-glisin-prolin (FIGP) hasil isolasi dari kulit ikan bluefin leatherjacket (Navodon septentrionalis) memiliki aktivitas antioksidan, namun keterbatasan hasil isolasi membatasi pemanfaatannya lebih lanjut. Penelitian ini bertujuan untuk mensintesis FIGP menggunakan metode Solid Phase Peptide Synthesis (SPPS), mengkarakterisasi produk sintesis, serta mengevaluasi aktivitas antioksidannya dengan metode DPPH. Sintesis dilakukan pada resin 2-klorotritil klorida melalui tahapan pengkondisian reaktor, pengembangan (swelling) resin, pengkoplingan berurutan asam amino terlindungi Fmoc (prolin, glisin, isoleusin, dan fenilalanin) menggunakan reagen HATU/HOAt/DIPEA, deproteksi Fmoc, uji kloranil, dan pemutusan peptida dari resin menggunakan TFA:TIS:Mili-Q (38:1:1). Krud peptida yang diperoleh dikarakterisasi menggunakan KCKT fase terbalik dan spektrometri massa, sedangkan aktivitas antioksidan dinyatakan sebagai nilai IC₅₀. Sintesis berhasil dilakukan dengan nilai loading resin sebesar 0,5 mmol. Karakterisasi KCKT menunjukkan bahwa kemurnian sampel masih rendah karena terdapat beberapa puncak minor, sedangkan spektrometri massa mengonfirmasi terbentuknya FIGP dengan puncak m/z 431 [M−H]⁻. Uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH menghasilkan nilai IC₅₀ rata-rata sebesar 1522,525 ppm, yang menunjukkan aktivitas antioksidan sangat lemah atau tidak memiliki aktivitas antioksidan. Penelitian selanjutnya disarankan melakukan pemurnian menggunakan kromatografi kolom dengan fase diam C18 serta karakterisasi lanjutan menggunakan NMR untuk memastikan kemurnian dan struktur tetrapeptida.]]>
