Claim Missing Document
Check
Articles

Found 2 Documents
Search
Journal : Sainstek

POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) K.Yusuf, Zuhriana
Sainstek Vol 5, No 2, 2010
Publisher : Sainstek

Show Abstract | Download Original | Original Source | Check in Google Scholar | Full PDF (49.487 KB)

Abstract

(Polymerase Chain Reaction, PCR) adalah suatu metode enzimatis untuk amplifikasi DNA dengan cara in vitro. Pada proses PCR diperlukan beberapa komponen utama, yaitu DNA cetakan, Oligonukleotida primer, Deoksiribonukelotida trifosfat (dNTP), Enzim DNA Polimerase, dan Komponen pendukung lain adalah senyawa buffer. Pada proses PCR menggunakan menggunakan alat termosiklus. Sebuah mesin yang memiliki kemampuan untuk memanaskan sekaligus mendinginkan tabung reaksi dan mengatur temperatur untuk tiap tahapan reaksi. Ada tiga tahapan penting dalam proses PCR yang selalu terulang dalam 30-40 siklus dan berlangsung dengn cepat yaitu denaturasi, anneling, dan pemanjangan untai DNA. Produk PCR dapat diidentifikasi melalui ukurannya dengan menggunakan elektroforesis gel agarosa. Teknik PCR dapat dimodifikasi ke dalam beberapa jenis diantaranya : PCR- RFLP, PCR RAPD, nested- PCR,Quantitative- PCR, RT- PCR dan inverse PCR. Keunggulan PCR dikatakan sangat tinggi. Hal ini didasarkan atas spesifitas, efisiensi dan keakuratannya. Kata kunci : PCR
Analisis RAPD ( Random Amplified Polymorphic DNA)untuk Diferensiasi Mycobacteriun tuberculosis isolat klinik sensitif INH dan Rifampisin di Makassar Yusuf, Zuhriana K.
Sainstek Vol5, No 1, 2010
Publisher : Jurnal Sainstek

Show Abstract | Download Original | Original Source | Check in Google Scholar | Full PDF (58.91 KB)

Abstract

This study aims to find out: (1) whether there is a genetic diversity on M.tuberculosis isolat clinic that is sensitif to INH dan rifampisin with RAPD method, and (2) the description of its polimorfism diferentiation. The research samples include 5 Mycobacteriun tuberculosis isolate that is sensitive to INH and rifampisin. The study includes DNA extraction using Wizard Genom DNA purification method, amplification using 5 primer: A-2 (5 TGCCGAGTCG 3 , 70% G+C ), OPN-09 ( 5TGCCGGCTTG 3, 70% G+C), N-9 (5 TGCCGGCTTG 3, 70% G+C), BG-66 (5CGACGCTGCG 3, 80% G+C) , 80% G+C), U-19 ( 5 GTCAGTGCGG 3, 70% G+C), and electroforesis. The isolat genetic diversity was analysed by using Dendro Unweighted Pair Group Method of Aritmethic (UPGMA) : A Dendogram Construction Utility method from Dr. Santi GarciaValive/2009. The results show that there is a genetic diversity on the 5 isolate Mycobacterium tuberculosis that are sensitive to INH and rifampisin, amplified with 5 primer. The size of amplified DNA bands is between 200-1100bp. The genetic variation can be seen in the number of fragments, the size of fragments and the number of polimorfik bands. The polimorfik percentage of the isolate is between 66.67% - 100%, or 80.28 in average. The UPGMA analysis results in a dendogram with a group cooficient of 0 40% or a diversity of 60 100%. Keywords: RAPD, Mycobacterium tuberculosis, sensitive to INH and rifampisin.